精准处置超微量分光光度计故障是保障数据可靠性的关键

更新时间：2026-02-03

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　　超微量分光光度计凭借仅需0.5–2μL样品、无需比色皿、快速检测核酸/蛋白浓度与纯度的优势，已成为分子生物学、基因组学及生物制药实验室的标配设备。因其依赖液滴表面张力形成光路，对操作洁净度与环境极为敏感，可能会出现读数漂移、A260/A280异常、基线噪声大或液滴塌陷等问题。科学识别并精准处置超微量分光光度计故障，是保障数据可靠性的关键。

　　一、核酸浓度偏低或无读数

　　原因分析：

　　样品未正确置于检测pedestal（上下光纤端面）；

　　液滴体积不足（＜0.5μL）或含有气泡；

　　光纤端面污染或划伤。

　　解决方法：

　　用移液器轻触上臂，使液滴在上下检测面间形成稳定“液桥”；

　　确保加样量≥1μL，缓慢释放避免气泡；

　　每次使用前后用无绒布蘸无水乙醇擦拭上下检测面，禁用纸巾或丙酮。

　　二、A260/A280比值异常（如DNA＜1.7，RNA＜2.0）

　　原因分析：

　　蛋白质或酚类残留污染（比值偏低）；

　　样品稀释液非匹配缓冲液（如用水代替TE）；

　　检测面残留前次样品交叉污染。

　　解决方法：

　　重新纯化样品（如柱纯化或氯仿抽提）；

　　使用与样品制备相同的缓冲液作为空白（如10mMTris,pH8.0）；

　　执行“Blank”校准后立即检测，避免空气污染物沉积。

　　三、重复性差（同一样品RSD>5%）

　　原因分析：

　　移液器未校准或操作手法不一致；

　　环境湿度低（<30%），液滴快速蒸发；

　　样品本身不均一（如未混匀或含颗粒）。

　　解决方法：

　　使用经校准的低吸附吸头，垂直加样；

　　在湿度40–60%环境中操作，或加盖防蒸发罩（部分机型支持）；

　　检测前涡旋混匀，离心去除颗粒。

　　四、基线漂移或背景噪声高

　　原因分析：

　　光源老化或光纤污染；

　　空白未正确校准（如用脏水或错误缓冲液）；

　　强光直射检测窗口。

　　解决方法：

　　每日开机后执行空白校准；

　　避免阳光或强灯光直射仪器；

　　若基线持续异常，运行仪器自检程序或联系工程师校准光源。